抗肿瘤血管三结构域单链抗体VH/L的构建与表达

摘要

以本室研制的一株抗肿瘤血管单克隆抗体AA98为基础,采用PCR扩增抗体AA98基因的重链可变区(VH)和轻链(L),以重链恒定区1(CHl)5′端12个氨基酸的序列作为连接肽,并将连接肽中的Lys突变为Ser,构建VH-连接肽-L三结构域单链抗体.重组VH/L单链抗体在大肠杆菌中得到了高效表达,其表达量占菌体总蛋白质的20%.表达的蛋白质在菌内形成包含体,经凝胶过滤法复性,获得了有抗原结合活性的VH/L.该三结构域单链抗体的成功构建和复性,为重组抗体片段的研制提供了借鉴.