乳头瘤病毒11型完整基因组成功转染角质形成细胞并促其增殖

摘要

构建含人乳头瘤病毒11(Human papillomavirus type 11,HPV11)完整开放读码框(Open reading frame,ORF)基因组的质粒并对其功能进行初步验证.为构建HPV11转基因动物模型奠定基础.分别构建重组质粒pQE-TrisystemEGFP/HPV11(pE/H)、pQE-Trisystem-EGFP/1.1copyHPV11(pE/1.1H),将pE/1.1H、pE/H,闭环状HPV11基因组分别转染原代人角质形成细胞(Keratinocyte,KC)并进行检测.在质粒上成功构建了目的序列,转染后在pE/1.1H组、pE/H组.HPV11组中检测到HPV11E6基因的表达;在pE/1.1H组、pE/H组中检测到荧光;HPV11组、pE/H组、pE/1.1H组具备促细胞增殖功能,实验组间比较pE/1.1H组稍弱(P＜0.01),但与对照组相比均差异极显著(P＜0.01).将具有完整ORF的HPV11基因组(1.1copyHPV11)成功构建于质粒上,其具备野生型HPV11病理表型;为研究低危型HPV致病机理提供了实验材料和方法学指导;为进一步构建HPV11转基因小鼠奠定了基础.