一种基于核酸外切酶Ⅲ的PCR产物克隆方法

摘要

基因克隆作为一种常规技术被广泛应用于DNA及蛋白质的研究.在传统的基因克隆中,一般利用限制性内切酶对DNA片段进行消化,然后使用DNA连接酶完成连接,因此这种方法受到插入片段和载体酶切位点的限制.一些ligase-free克隆技术虽然克服了酶切位点的限制,但费时费力,成本较高.为了弥补其他ligase-free技术的不足,文中介绍了一种新的利用核酸外切酶Ⅲ进行ligase-free克隆的方法,反应时间仅需要30 min,提高了克隆效率并有效降低经济成本,有利于大规模基因克隆的应用.