人源化单链抗体与白细胞介素2融合蛋白靶向治疗肿瘤的实验研究

摘要

目的评价人源化抗Her2/neu单链抗体及人白细胞介素2(hIL-2)双功能融合蛋白H520C9scFv-hIL-2治疗Her2/neu阳性肿瘤的效果。方法将构建的表达载体转染293细胞,G418筛选阳性克隆建立稳定表达细胞系。免疫印迹法(Western blotting)、酶联免疫吸附试验(ELISA)及[3H]脱氧胸苷(3H-TdR)渗入法检测融合蛋白浓度和生物学活性。建立荷瘤小鼠肿瘤模型,静脉给药,观测肿瘤体积变化判断治疗效果。结果细胞培养上清中融合蛋白浓度达(1.2±0.23)mmol/L,5μl上清即可在46000处见到清晰蛋白条带。纯化后的融合蛋白两个功能单位活性良好,在荷瘤小鼠肿瘤模型治疗实验中显示了明确的治疗效果。结论哺乳动物细胞可高效表达生物活性良好的融合蛋白H520C9scFv-hIL-2,该蛋白在体内实验中有明显的抑瘤作用,显示了较好的应用前景。