荧光猝灭法测定梨小食心虫性诱剂含量以及田间应用

摘要

β−环糊精(β−CD)与中性红(NR)在碱性缓冲溶液中形成包合物(β−CD−NR),使中性红的荧光强度F增大,而加入梨小食心虫性诱剂主要成分顺−8−十二碳烯醇乙酸酯(Z8−12:Ac)后,β−CD−NR的荧光发生猝灭,以此建立了测定Z8−12:Ac含量的新方法:在含有1.0 mL 1.0×10^(−3) mol/L中性红、5.0 mL 1.0×10^(−2) mol/L的β−CD、7.0 mL 0.2 mol/L的NaH2PO4−Na2HPO4缓冲溶液(pH 7.4)的荧光体系中,加入Z8−12:Ac,以双蒸水定容至25.0 mL,超声反应20 min后,将其放置在4°C的环境下冷却,得待测液。在激发波长为460 nm、发射波长为580 nm的条件下测定待测液的荧光强度F和β−CD−NR体系的荧光强度F0,计算荧光猝灭值ΔF(ΔF=F0—F)。比较分析不同浓度的Z8−12:Ac标准溶液与相应的荧光猝灭值ΔF的关系,结果表明:在Z8−12:Ac浓度为1.0×10^(−4)~4.0×10^(−4) mol/L范围内,荧光猝灭值ΔF与Z8−12:Ac的浓度c呈现良好的线性关系,线性方程为:ΔF=28.3 c—16.8,R2=0.9978。对2.0×10^(−4) mol/L的Z8−12:Ac溶液进行11次平行测定,得出方法检出限为1.25×10^(−5) mol/L(S/N=3),RSD为±1.5%,方法灵敏度和精密度良好。加标回收率在98.0%~103.0%,说明方法准确度良好。利用新方法测定了田间梨小诱芯中Z8−12:Ac随时间的残留量,统计了不同残留量对应的诱虫量。结果表明,本方法可以成功测定不同天数下诱芯中Z8−12:Ac的残留量,掌握了诱芯中Z8−12:Ac的衰减趋势,而且与实际诱虫量变化趋势基本吻合。本方法可为确保田间虫情监测预报的精确性以及保持性诱芯的诱杀效果提供技术支撑。