Eisenia fetida中蚯蚓纤溶酶P-Ⅲ组分序列多态性

摘要

为了探讨蚯蚓纤溶酶P-Ⅲ组分序列多态性及其与蚓种关系.从Eisenia fetida中提取总RNA,利用P-Ⅲ组分序列两端的保守性设计引物,通过RT-PER获得P-Ⅲ组分基因,并构建该组分质粒(pUC18)文库,经PCR筛选后进行序列测定及分析.在原已获得的Efp-Ⅲ-1和Efp-Ⅲ-3的基础上,利用中间引物从文库中筛选到Efp-Ⅲ-2基因.序列分析表明,该基因编码序列为720bp,编码239个氨基酸,与GenBank报道的Efp-Ⅲ-2五条序列整体相似性高达99.02%.通过序列比对,发现Efp-Ⅲ-1、2和3具有完全相同的结构域,差异位点零星分布在序列中间;Lumbricus rubellus的六条序列同样具有Eiseniafetida这个特点,并无明显差异.序列比对证明它们是蚯矧体内P-Ⅲ分基因多态性的表现,而且在Lumbricidae科中与蚓种无关.