体外转染NHE-1核酶对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

摘要

目的:探讨锤头状核酶对大鼠肺动脉平滑肌细胞Na+/H+交换器-1(NHE-1)表达和活性、pHi的影响,及其与细胞增殖的关系.方法:构建含锤头状核酶序列的pLXSN反转录病毒重组载体,将其转染体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞,G418筛选后获取含有重组载体的细胞克隆,检测细胞NHE-1 mRNA表达、22Na摄取量、pHi和3H-TdR掺入量. 结果:与转染pLXSN空载体的细胞和正常对照组细胞比较,转染重组载体的肺动脉平滑肌细胞中NHE-1 mRNA表达、22Na摄取量减少,同时伴有pHi降低和3H-TdR掺入量减少,正常对照组和空载体组间无显著差异.结论:NHE-1特异性锤头状核酶可对NHE-1 mRNA进行特异性切割,减少其表达,从而诱导细胞酸化,抑制肺动脉平滑肌细胞增殖.