含LacZ报告基因的传染性喉气管炎病毒TK基因转移载体质粒的构建

摘要

在传染性喉气管炎病毒北京Ｅ２株ＴＫ基因克隆，鉴定的基础上，进一步构建转移载体质粒，为ＩＬＴＶ ＴＫ基因缺失毒株的构建作准备，先用ＰｓｔＩ将ｐＳＶ－ｇａｌ线性化，再经ＥｃｏＲｉ不完全酶切，分离含ＳＶ４０立即早期启动子和增强子的４．２Ｋｂ的ＬａｃＺ报告基因片段，并用Ｋｌｅｎｏｗ大片段补平，将克隆ＴＫ基因的载体ｐＴＫ用ＳｎａＢＩ处理，后用Ｔ４ＤＮＡ连接酶将以上两个片段平端连续成重组质粒，转化 ＪＭ１０９