核移植方法和维生素C影响绵羊克隆胚胎体外发育

摘要

旨在研究绵羊体细胞核移植过程中,不同核移植方法及胚胎培养液中添加维生素C对绵羊克隆胚胎生产效率的影响,为优化绵羊体细胞克隆技术体系提供试验依据.用屠宰场采集的绵羊卵巢为试验材料,经卵母细胞体外成熟后进行核移植操作,采用微电极融合、无透明带克隆与显微注射等核移植方法,比较胚胎构建效率,利用绵羊孤雌胚胎摸索发育液中添加维生素C最适浓度,将该浓度用于克隆胚胎体外培养,统计胚胎发育情况.结果表明:采用25 V微电极融合法融合率显著高于平行电极融合法(P＜0.05),但与30 V电压差异不显著.25 V电压微电极融合法死卵率显著低于30 V融合法(P＜0.05);无透明带构建克隆胚胎的桑椹胚率显著高于显微注射法(P＜0.05),但囊胚率差异不显著(P＞0.05);胚胎培养液中添加50 μmol·L-1维生素C显著提高了孤雌激活与体细胞克隆胚胎囊胚率(P＜0.05).综上所述,微电极融合法可显著提高绵羊体细胞核移植融合效率,无透明带构建方法不能显著提高克隆胚胎囊胚率,胚胎培养液中添加50 μmol·L-1维生素C可显著提高绵羊克隆胚胎囊胚率.