公山羊β防御素104a生物信息学分析及表达特性研究

摘要

旨在预测山羊β防御素104a蛋白质特性,研究其在成年公山羊生殖组织及其他组织中的表达特性及其定位.采用在线软件对gBD104a基因(KJ508074.1)进行生物信息学分析,用QRT-PCR法检测gBD104a mRNA在睾丸、附睾及其他组织中的表达情况,用免疫荧光技术对生殖组织和精子中的gBD104a进行定位.结果,(1)生物信息学分析结果表明gBD104a基因cDNA全长324 bp,编码107个氨基酸,第1～19个氨基酸为信号肽,第27～55个氨基酸为潜在的β防御素构象区域,在C端有7个潜在的O糖基化位点;(2) QRT-PCR结果表明,gBD104a在附睾体中表达量最高,在附睾头、气管、皱胃、空肠、回肠等组织中表达量较高,其他组织中表达量均较低;(3)免疫组化定位结果显示,在附睾头和体部的假复层纤毛柱状上皮细胞检测到较强的gBD104a阳性信号,在附睾尾部的纤毛柱状上皮细胞也检测到较强的阳性信号.gBD104a包裹在精子头部顶体和中段线粒体表面.gBD104a是一种分泌型糖蛋白,在成年公山羊机体各组织中广泛表达,但主要表达在附睾体,是精子表面的主要成分.推测可能与精子运动、顶体反应和获能有关.需要进一步深入研究其功能.