鸡粪发酵液中总游离氨基酸的粗提取及茚三酮法检测

摘要

为有效提取鸡粪发酵液中的游离氨基酸,本文研发了一种游离氨基酸提取方法,即以鸡粪发酵液为原料,经过碱性蛋白酶水解,双水相萃取,利用茚三酮-可见光分光光度法测总氨基酸含量,并探讨了38～52°C(以2°C为梯度)下水解2 h后总游离氨基酸的产率.结果显示:随水解温度升高,水解2 h后鸡粪发酵液中总游离氨基酸的产率先增后减,44°C下产率最大,达65.08 mg/mL;不同温度下的水解效率为η(44°C)>η(46°C)>η(42°C).随着水解时间延长,水解效率逐渐提高,氨基酸产率也随之升高,水解48 h后,氨基酸含量在44°C时达到133.04 mg/mL.同时,发酵液存在自发水解现象,平均每月水解产生氨基酸1 mg/mL.