多脊椎蒙古羊Hoxc8 exon-1甲基化分析

摘要

研究旨在探索多脊椎蒙古羊多脊椎性状与Hoxc8 exon-1的甲基化比例是否可以成为多脊椎蒙古羊早期选种的DNA分子标记.克隆多脊椎蒙古羊(14个胸椎)和正常蒙古羊(13个胸椎)的Hoxc8 exon-1,超声波破碎基因组DNA并变性.用5-甲基胞嘧啶抗体做选择性免疫反应,经抗体结合磁珠免疫沉淀,分离纯化甲基化DNA.设计2对多脊椎蒙古羊Hoxc8 exon-1引物进行实时定量PCP,分别分析免疫沉淀后的甲基化DNA浓度.引物P2扩增,6只多脊椎蒙古羊和4只正常蒙古羊样本校正后的甲基化DNA浓度分别为11.50%、11.00%、5.28%、4.49%、2.89%、2.41%和1.20%、0.60%、0.35%、0.03%,两实验组差异显著(P<0.05).引物P1扩增,两实验组甲基化DNA浓度差异不显著(P>0.05).P2引物扩增Hoxc8 exon-1的甲基化DNA浓度可以作为多脊椎蒙古羊早期选种的DNA分子标记.