复合酶制剂体外预消化仔猪饲粮最佳条件的筛选以及对其品质的影响

摘要

本研究旨在筛选出体外预消化复合酶制剂的最佳作用条件,比较复合酶预消化前后饲粮的差异,为无抗饲粮的研发提供参考。试验选用蛋白酶、淀粉酶、非淀粉多糖(NSP)类酶(纤维素酶、果胶酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶和α-半乳糖苷酶)、葡萄糖氧化酶(GOD)、阿魏酸酯酶(FAE)和阿拉伯呋喃糖苷酶(AF)10种酶,组成复合酶制剂,根据酶的理化特性,探索酶的作用温度和时间对预消化仔猪饲粮的影响,应用扫描电镜和激光共聚焦拍照技术评定酶解前后饲粮的结构变化,并通过细菌生长曲线观察酶解预消化饲粮对肠道有害菌的影响。结果表明:1)与未添加酶相比,添加蛋白酶,在pH=3的缓冲液中预消化,50℃作用0.5 h时,氨基酸和小肽分子含量显著升高(P<0.05);添加淀粉酶和NSP酶,在pH=5的缓冲液中反应,预消化1.0 h后,二硝基水杨酸(DNS)法检测得到50℃时还原糖含量极显著升高(P<0.01),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测发现50℃时部分抗营养因子含量也显著降低(P<0.05)。2)本试验分析木聚糖主链酶与其支链酶的协同作用,结果显示先添加AF和FAE,再添加木聚糖酶后酶解饲粮,还原糖的释放量比单独添加木聚糖酶提高了79.07%(P<0.01)。此外,再添加GOD,产生的葡萄糖酸含量为1.32μg/mL,并且降低了饲粮的pH。3)扫描电镜和罗丹明B染色结合激光共聚焦拍照检测发现,经过复合酶制剂预消化,饲粮的细胞壁损伤严重,完整结构遭到破坏。4)本试验选用从腹泻猪肠道中分离出的大肠杆菌和沙门氏菌来检验饲粮酶解产物的抑菌作用,结果表明酶解预消化后可以抑制大肠杆菌和沙门氏菌的生长。综上所述,酶制剂的最佳组合条件为:首先在pH=3、50℃下,加入蛋白酶,作用时间为0.5 h;接着上调pH为5,加入AF、FAE和GOD,40℃作用1.0 h;最后加入淀粉酶和NSP酶群50℃作用1.0 h。酶解后的饲粮,其可利用的营养物质含量提高,抗营养因子含量降低,并可以抑制有害菌的生长。