L-茶氨酸对过氧化氢诱导山羊瘤胃上皮细胞凋亡的保护作用

摘要

本试验旨在研究L-茶氨酸对过氧化氢(H2O2)诱导山羊瘤胃上皮细胞凋亡的保护作用.采集42日龄的湘东黑山羊的瘤胃组织进行原代细胞分离、培养、纯化.对照组采用完全培养基,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在完全培养基中添加800μmol/L H2O2、4 mmol/L L-茶氨酸+800μmol/L H2O2、8 mmol/L L-茶氨酸+800μmol/L H2O2和16 mmol/L L-茶氨酸+800μmol/L H2O2,每组3个重复.培养12 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,采用流式细胞术检测细胞周期,采用实时定量PCR法和蛋白质印迹(Western blot)法检测Bax和Bcl-2基因及其蛋白的表达.结果表明:L-茶氨酸能显著提高H2O2损伤的瘤胃上皮细胞存活率(P<0.05),显著增加S期细胞比例(P<0.05),显著降低Bax基因和蛋白表达量(P<0.05),显著提高Bcl-2基因和蛋白表达量(P<0.05),显著提高Bcl-2和Bax基因和蛋白表达量的比值(P<0.05).结果提示,L-茶氨酸能通过抑制细胞凋亡来有效地保护由H2O2导致的瘤胃上皮细胞损伤;体外条件下,培养液中添加的L-茶氨酸浓度高于8 mm/L时能有效发挥抗凋亡作用.对瘤胃上皮细胞损伤有一定的治疗和保护作用.