PICK1在瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓含GluR1及GluR2亚基的AMPA受体转运中的作用

摘要

目的评价蛋白激酶Cα相互作用蛋白1（PICK1）在瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓含GluR1及GluR2亚基的AMPA受体转运中的作用。方法 SPF级雄性SD大鼠32只,体重240~260 g,42~49日龄,鞘内置管成功后,采用随机数字表法分为4组（n=8）:对照组（C组）、生理盐水±瑞芬太尼组（NS+R组）、PICK1反义核苷酸+生理盐水组（AS+NS组）和PICK1反义核苷酸+瑞芬太尼组（AS+R组）。C组、NS+R组鞘内注射生理盐水10μl,AS+NS组、AS+R组鞘内注射硫代修饰的PICK1反义核苷酸10μg/10μl,1次/d,连续4 d。鞘内注射结束后,NS+R组和AS+R组静脉输注瑞芬太尼1.2μg·kg-1·min-160 min,C组和AS+NS组静脉输注等容量生理盐水60 min。于静脉输注生理盐水或瑞芬太尼前24 h、输注结束后2、6、24和48 h(T0-4)时测定机械缩足反应阈（MWT）和热缩足潜伏期（TWL）。最后一次痛阈测定结束后处死大鼠,采用Western blot法测定脊髓细胞膜及细胞浆含GluR1及GluR2亚基的AMPA受体的表达水平。计算细胞膜与细胞浆蛋白表达水平的比值（m/c比值）和细胞膜含GluR1及GluR2亚基的AMPA受体的表达水平的比值（mGluR1/mGluR2比值）。结果与C组比较,NS+R组和AS+R组T1-4时TWL缩短,MWT降低,细胞膜含GluR1亚基的AMPA受体表达上调,其m/c比值升高,细胞膜含GluR2亚基的AMPA受体表达下调,其m/c比值降低,mGluR1/mGluR2比值升高（P＜0.05）。与NS+R组比较,AS+R组T1-4时TWL延长,MWT升高,细胞膜含GluR2亚基的AMPA受体表达上调,其m/c比值升高,mGluR1/mGluR2比值降低（P＜0.05）,其余指标差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 PICK1可促进脊髓含GluR2亚基的AMPA受体内化,而对含GluR1亚基的AMPA受体转运无影响,该作用可能参与了瑞芬太尼诱发大鼠痛觉过敏形成的机制。