BDNF过表达的MSCs成功干预大鼠神经性阴茎勃起功能障碍的实验研究

摘要

目的 探索在海绵体神经损伤的大鼠神经性阴茎勃起功能障碍(NED)模型中,注射BDNF过表达的MSCs在神经再生和修复中的作用.方法 建立脑源性神经营养因子(BDNF)过表达的骨髓间充质干细胞(MSCs),通过Western Blot检测BDNF和VEGF-A的表达的水平.通过Elisa检测BDNF和VEGF-A在细胞上清液中的含量.取120只3月龄大鼠随机分为4组:第1组为假手术组(Sham组),其余三组均损伤双侧海绵体神经,第2组(Control组)不再进行干预,第3组(MSC组)和第4组(BDNF-MSC)分别在关腹前注射MSCs和BDNF过表达的MSCs.大鼠在手术造模后12周,通过海绵体神经电刺激并测阴茎海绵体内压(ICP)来评价阴茎勃起功能.取大鼠阴茎海绵体组织行免疫组化评价诱导型NO合酶(iNOS)的表达水平.结果 通过绿色免疫荧光试验证实BDNF过表达MSCs制备成功.Western Blot验证结果显示BDNF过表达的MSC细胞中的BDNF和VEGF-A表达水平较MSC细胞明显上调,ELISA验证结果显示BDNF过表达的MSC细胞上清液中的BDNF和VEGF-A表达水平较MSC细胞上清液明显上调.手术后12周,通过海绵体神经电刺激并测ICP来评价阴茎勃起功能,其中假手术组平均最大ICP为(102.20±15.61)cmH2O,实验对照组为(35.47±13.16),MSC干预组为(43.79±16.94)cmH2O,BDNF-MSC干预组为(66.04±15.33) cmH2O.免疫组化结果显示,BDNF-MSC干预组大鼠阴茎海绵体组织内iNOS阳性表达细胞数明显高于MSC干预组.结论 本研究结果显示局部注射MSCs和BDNF过表达的MSCs对于大鼠的NED具有治疗作用.