中药土鳖虫溶栓成分的分离纯化研究

摘要

对土鳖虫水浸醇沉提取物2号样品进行了离子交换柱层析,得组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ.实验结果表明,组分Ⅲ的溶栓活性明显高于组分Ⅰ和组分Ⅱ,其蛋白质含量为88.9%,分子量约为38,018,效价为313 UK/mg,比活力为352 UK/mg蛋白.将组分Ⅲ再进行凝胶过滤柱层析,得组分Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ.组分Ⅵ的生物活性高于组分Ⅳ和组分Ⅴ,蛋白质含量为89.3% ,电泳呈现两条带,分子量约为34,623和39,811, 效价为77 UK/mg,比活力为86 UK/mg蛋白.将组分Ⅵ进行反相高效液相色谱柱层析,收集保留时间为17 min的洗脱峰,得到土鳖虫纯蛋白质,呈白色絮状,极易溶于水.再一次用反相高效液相色谱检查其纯度,保留时间为17.073 min,无杂质峰.纤溶活性实验结果表明,组分Ⅵ既有直接降解纤维蛋白的作用,同时也有纤溶酶原激活剂样作用.