弱阳离子交换毛细管整体柱的制备与蛋白质分离

摘要

以甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,正丙醇、1,4-丁二醇和水为致孔剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,在0.32 mm内径弹性石英毛细管内原位制备了聚合物整体固定相基质.优化得到的最佳反应物组成为V(GMA):V(EDMA):V(正丙醇):V(1,4-丁二醇):V(H2O)=0 32:0.08:0.35:0.2:0.05,在60 ℃反应24 h,得到了孔径分布在100～300 nm的大孔型整体固定相.用亚胺基乙二酸(IDA)对整体柱进行表面改性,制备了羧酸基弱酸型阳离子交换整体固定相.优化得到的最佳改性条件是:反应时间24 h、温度75 ℃和pH 12.0.本研究制备的一根仅5 cm长的弱阳离子交换毛细管整体柱可以在13 min内分离粗卵蛋白、胰蛋白酶和溶菌酶3种模型蛋白质.