蓝藻热休克诱导高效表达系统的构建

摘要

以聚球藻Synechococcus sp.PCC7942作为基因工程受体菌,构建了热休克诱导的高效表达系统.用PCR法扩增并克隆出Synechococcus sp.PCC7942自身的热休克基因groESL操纵子的强启动区(240bp),并紧靠其后组装上泛素(UB)融合的胸腺素α 1(Tα 1)目的基因,在下游组装有rbcS polyA终止子.此外,还组装了一个完整的卡那霉素抗性基因作为筛选标记基因.这样,就构建了完整的蓝藻的基因表达系统.经转化蓝藻Synechococcus sp.PCC7942细胞,在42℃热诱导30min后,目的基因UB-Tα1得到较高水平表达,表达量约占可溶性蛋白的8.7%.