苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白基因vip3A的研究

摘要

根据已知vip3A基因序列设计一对特异性引物VIP3/VIP5,对218株Bt菌株进行PCR鉴定,有51株含有vip3A类基因,其中12株为不同亚种的标准菌株,有4株标准菌株不含有该基因.从Bt C9菌株中分离克隆了vip-C9基因,并插入表达载体pET-21b,转化大肠杆菌BL2 1,诱导表达出分子量88.6kDa的可溶性蛋白,表达产物对甜菜夜蛾和棉铃虫具有较高的杀虫活性,LC50分别为0.42ng/mg和25.95ng/mg,对小菜蛾活性较低.构建了缺失蛋白Vip-C9- N(N端去除39个氨基酸组成的信号肽序列),杀虫活性测定结果表明其对甜菜夜蛾的活性显著降低,说明N端39个氨基酸对甜菜夜蛾的活性是必需的.