Ⅰ型胶原及骨膜蛋白在骨质疏松大鼠骨髓基质细胞膜片中的表达研究

摘要

目的:探究Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、骨膜蛋白(POSTN)在骨质疏松大鼠骨髓基质细胞(BMSC)膜片中的表达情况。方法:在体外分离培养骨质疏松大鼠BMSCs,鉴定其克隆形成能力、多向分化能力,采用富含L-抗坏血酸培养基连续诱导构建细胞膜片,诱导5、10 d形成的细胞膜片经HE染色及Masson染色后,观察细胞膜片结构,分别采用qRT-PCR及免疫组织化学染色检测细胞外基质(ECM)中Col-Ⅰ、POSTN在基因及蛋白水平的表达情况。结果:体外分离培养的骨质疏松大鼠BMSCs具有克隆形成能力及成骨、成脂分化能力,L-抗坏血酸连续诱导获取的细胞膜片富含ECM;qRT-PCR结果显示,诱导第10天细胞膜片的ECM相关基因Col-Ⅰ及POSTN的mRNA相对表达量高于第5天(P<0.05);免疫组织化学染色结果显示诱导时间延长,细胞膜片中的ECM相应增多,且高表达Col-Ⅰ及POSTN。结论:PMO大鼠BMSC膜片可保留自身分泌的ECM,细胞膜片富含Col-Ⅰ及POSTN,为后续自体移植细胞膜片实现骨质疏松状态下骨组织再生提供帮助。