促红细胞生成素通过叉头状转录因子O1-糖原合酶激酶3β信号改善棕榈酸诱导HepG2细胞糖代谢

摘要

目的观察促红细胞生成素（EPO）处理对棕榈酸（PA）诱导HepG2细胞糖异生及糖原合成的影响及作用机制。方法 250μmol/L的PA作用HepG2细胞24h,分别用5、10U/mlEPO作用24h,另外,EPO处理的HepG2细胞分别加人磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）特异性抑制剂LY294002或渥曼青霉素（wortmannin）预孵育1 h。比色法检测HepG2细胞糖原含量,Western blotting检测磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）、PI3K蛋白表达、蛋白激酶B（AKT）、叉头状转录因子01（FOX01）、糖原合酶激酶3β（GSK-3β）表达。多组间比较采用方差分析。结果与PA处理组相比,5 U/ml和10U/mlEPO处理组细胞下游分子GSK-3β（分别为1.02±0.03比0.74±0.11、1.06±0.02比0.74±0.11,t=4.236、4.996,均P＜0.05）及FOX01磷酸化水平明显增强（分别为0.99±0.05比0.73±0.09、1.13±0.06比0.73±0.09,t=4.798、6.757,均P＜0.05）。与EPO治疗组比较,加入抑制剂LY294002或wortmannin后,GSK-3β（0.68±0.09比1.12±0.14、0.76±0.10比1.12±0.14,t=-4.632、-3.655,均P＜0.05）及FOXO1（0.92±0.02比1.15±0.06、0.72±0.07比1.15±0.06,t=-6.532、-7.984,均P＜0.05）磷酸化水平均明显被抑制。结论在PA诱导的HepG2细胞,EPO可能通过PI3K/AKT介导的FOXO1、GSK-3β通路改善糖代谢。