胍丁胺对严重创伤所致肝损伤的保护作用

摘要

目的观察胍丁胺对肝脏库普弗细胞分泌炎性因子的影响,探讨其对严重创伤所致肝损伤的保护作用及其机制。方法将42只雄性BALB/c小鼠按随机数字表法分为假手术（Sham）组、模型组、胍丁胺干预组,每组14只。采用双后肢骨折联合眼眶放血35%的方法制备小鼠创伤失血模型;Sham组仅麻醉小鼠不进行其他处理。胍丁胺干预组于制模后1 h液体复苏时腹腔注射胍丁胺200 mg/kg;模型组给予等量生理盐水。各组于制模后12 h、24 h分别处死7只小鼠取血和肝脏,并分离肝脏库普弗细胞。用全自动生化分析仪测定血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）及乳酸脱氢酶（LDH）水平;苏木素-伊红（HE）染色,光镜下观察肝组织病理学变化;用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清、肝组织及肝脏库普弗细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的含量;用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测库普弗细胞中TNF-α和IL-6的mRNA表达。结果①Sham组小鼠肝组织结构正常;模型组小鼠制模后24 h可见中性粒细胞浸润,肝细胞肿胀、充血、坏死,且肝功能指标明显异常;而胍丁胺能明显改善上述病理学变化,改善肝功能。②制模后12h 3组血清和肝组织TNF-α、IL-6水平均无明显差异,24h模型组较12h时升高,且均显著高于Sham组[血清TNF-α（ng/L）:80.8±4.7比34.7±4.7,IL-6（ng/L）:104.0±9.0比55.4±3.3;肝组织TNF-α（ng/ms）:405.2±19.6比57.2±10.0,IL-6（ng/mg）:58.4±7.7比14.3±2.1,均P＜0.01];胍丁胺能有效降低创伤小鼠血清和肝组织TNF-α、IL-6水平[血清TNF-α（ng/L）:58.2±3.1比80.8±4.7.IL-6（ng/L）:74.1±6.6比104.0±9.0;肝组织TNF-α（ng/mg）:248.7±22.5比405.2±19.6,IL-6（ng/mg）:22.5±3.1比58.4±7.7,均P＜0.01]。③模型组体外培养库普弗细胞上清液中TNF-α和IL-6水平均较Sham组明显升高,经脂多糖（LPS）诱导培养24 h后,二者水平进一步升高;胍丁胺可显著降低TNF-α和IL-6水平[TNF-α（ng/）:256.6±5.6比465.5±5.2,IL-6（ng/L）:1185.5±64.4比2018.8±53.2,均P＜0.01],下调TNF-α和IL-6的mRNA表达[TNF-αmRNA(2-ΔΔCt):7.2±0.4比13.5±0.4,IL-6mRNA(2-ΔΔCt):13.2±0.7比21.3±1.6,均P＜0.01]。结论胍丁胺可通过降低库普弗细胞炎性因子的分泌和表达,从而缓解严重创伤所致的肝损伤,改善肝功能。