雷公藤甲素调节PI3K/Akt信号通路抑制结肠癌增殖并诱导凋亡的实验研究

摘要

目的 探讨雷公藤甲素抑制结肠癌增殖增殖、诱导凋亡的机制.方法 稳定培养结肠癌HT29细胞,分别加入含25、50、100、200、400、600 mg/L雷公藤甲素的培养基进行干预,采用CCK-8法、流式细胞术、细胞集落形成实验检测雷公藤甲素对HT29细胞增殖和凋亡的影响.构建裸鼠结肠癌移植瘤模型,将30只裸鼠随机分为对照组、雷公藤甲素100 mg/kg组和400 mg/kg组.对照组给予0.2 ml生理盐水灌胃,雷公藤甲素组灌胃剂量分别为100 mg/kg和400 mg/kg,1次/d,共14 d.比较各组裸鼠抑瘤率、检测移植瘤组织中细胞凋亡情况.结果 雷公藤甲素体外能抑制HT29细胞的增殖,且抑制作用呈浓度和时间依赖性.HT29细胞对照组、100 mg/L组、200 mg/L组、400 mg/L组的细胞凋亡率分别为(7.85±1.44)％、(13.86±2.08)％、(20.45±2.83)％、(28.52±2.41)％,差异均有统计学意义(P<0.05).随着雷公藤甲素干预浓度升高,HT29细胞中Bcl-2蛋白表达量逐渐降低,而caspase-3和Bax蛋白表达量逐渐升高(P<0.05).与对照组裸鼠比较,雷公藤甲素不同浓度给药组小鼠的肿瘤生长均受到明显抑制.100 mg/kg组抑瘤率为31.18％,400 mg/kg组为48.77％.雷公藤甲素干预后Ki67蛋白表达强度明显低于对照组(P<0.05).Western blotting结果显示,雷公藤甲素作用48 h后,不同剂量组HT29细胞中p-PI3K蛋白和p-Akt蛋白的表达水平逐渐降低(P<0.05).结论 雷公藤甲素在体内外均能抑制人结肠癌HT29细胞的增殖同时诱导其凋亡,并通过抑制PI3K/Akt信号通路活性抑制结肠癌裸鼠的肿瘤生长.