胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）在大鼠骨髓基质干细胞中的表达

摘要

目的构建表达外源性胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）的转基因大鼠骨髓基质干细胞（BMSCs），拟应用于脊髓损伤的基因治疗研究。方法提取新生大鼠肾组织lnRNA，用逆转录PCR法扩增GDNF全长cDNA，构建其真核表达载体PEG—GFP—GDNF，酶切及测序鉴定；然后转染原代培养的大鼠BMSCs，荧光免疫细胞化学及细胞形念学检测GDNF的表达。结果扩增到全长687bp序列准确的GDNF编码片段，并在GDNF转基因原代大鼠BMSCs中检测到重组GDNF的表达。结论体外可构建成功表达GDNF的转基因BMSCs，有望应用于脊髓损伤等中枢神经系统疾病的治疗研究。