抗CEA嵌合小分子抗体的构建与表达

摘要

目的构建表达抗CEA小分子抗体，以利于放射免疫诊断及导向治疗。方法构建CEA单链抗体基因，克隆入载体pKpL-3a，在大肠杆菌中包涵体表达，ELISA检测活性。将轻重链基因克隆入分泌型表达载体pSCMH，在大肠杆菌中表达．ELISA极测活性。将CEA嵌合抗体的轻链和Fd基因克隆入杆状病毒表达载体pAcUW51中，在sf9细胞中分泌表达，ELISA检测活性及测定产量．竞争抑制ELISA测定其识别的抗原表位。结果多种方法复性的包涵体及原核分泌表达的单链扎体束测到活性。昆虫细胞中表达的小分子抗体具抗体活性，产量为1．7μg／mL，竞争抑制实验显示其与亲本鼠单抗C50识别相同的表位。结论该CEA抗体基因在大肠杆菌中不能表达出有功能的分子，而在昆虫细胞中表达了具活性抗体分子；某些抗体基因只有在真核细胞中才能表达出有功能的抗体分子。