牛瘤胃未培养细菌中一个β-葡萄糖苷酶基因umbg13A的克隆及鉴定

摘要

通过构建牛瘤胃未培养细菌的宏基因组文库，共获得12000个克隆，文库外源DNA总容量为4．2×100bp，筛选得到九个表达β-葡萄耱苷酶活性的克隆，并对其中的一个表达β-葡萄耱苷酶活性的克隆pGXN1009进行亚克隆。将β-葡萄耱苷酶基因定位在4．3kb的片段上。测序结果表明在4．3kb的片段上有一个全长为1956bp的ORF，编码一个可能的阻葡萄耱苷酶基因umbg133A，其编码产物与一个来源于小鼠大肠未培养细菌的β-葡萄耱苷酶（GenBankAcession NO：AAXl6378．1）一致性为63％、相似性为79％；