基于PD-1/PD-L1信号通路艾灸治疗类风湿性关节炎的机制研究

摘要

目的:从程序性死亡因子1及其配体1(PD-1/PD-L1)入手,探讨艾灸治疗类风湿性关节炎(RA)的机制。方法:将30只日本大耳白兔随机分为对照组、模型组和艾灸组,每组10只。模型组和艾灸组家兔予双后肢膝关节腔内注射弗氏完全佐剂(FCA)制备RA模型;对照组注射等量0.9%氯化钠溶液。艾灸组于实验第8天予艾灸"肾俞""足三里",每穴5壮,双侧交替,每日1次,6次为一疗程,疗程之间休息1 d,共治疗3个疗程。实验第1、7、14、21、28天采用软皮尺测量家兔双侧膝关节周长;实验第28天,HE染色观察膝关节滑膜组织病理形态并评分,ELISA法检测膝关节滑膜液可溶性型程序性死亡因子1及其配体1(sPD-1、sPD-L1)、白介素-2(IL-2)、白介素-17(IL-17)及血清sPD-1、sPD-L1的含量,免疫组化法检测脾脏组织细胞膜型程序性死亡因子1及其配体1(mPD-1、mPD-L1)的表达。结果:实验第14、21、28天,模型组家兔双侧膝关节周长较对照组增加(P<0.01),艾灸组较模型组显著降低(P<0.01)。与对照组比较,模型组家兔膝关节滑膜组织、纤维组织增生,炎性细胞浸润明显增加(P<0.01),艾灸组较模型组均明显减少(P<0.01,P<0.05)。与对照组比较,模型组家兔膝关节滑膜液IL-2、IL-17含量升高(P<0.01);与模型组比较,艾灸组家兔干预后膝关节滑膜液IL-2、IL-17含量降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组家兔sPD-1、sPD-L1在膝关节滑膜液和血清中含量均升高(P<0.05);与模型组比较,艾灸组家兔sPD-1在膝关节滑膜液和血清中含量降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组家兔脾脏组织mPD-1、mPD-L1的表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,艾灸组家兔脾脏组织mPD-L1的表达上调(P<0.05)。结论:艾灸可能通过增强PD-1/PD-L1信号通路的负性调控,抑制T细胞的过度活化,从而发挥治疗RA的作用。