脑缺血大鼠骨髓间质干细胞移植后脑内分布与迁移

摘要

目的 观察骨髓间质干细胞移植后在脑缺血大鼠脑内的存活、分布及迁移情况.方法 Ficoll-Paque分离液梯度离心分离大鼠骨髓间质干细胞(rat bone mesenchymal stem cells,rMSCs),经体外培养扩增并流式细胞术鉴定;线拴法制作大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)脑局灶缺血模型,Hoechst 33342标记细胞,分别通过静脉移植及立体定向局部移植到大鼠缺血侧纹状体.经过1、3、5周处死大鼠,取脑组织切片,在倒置荧光显微镜下观察细胞在脑内的存活、分布及迁移情况.结果 应用梯度离心方法可以分离得到rMSCs,经过体外扩增可得到足够细胞数量用于移植,流式细胞术检测CD34、CD45表达阴性,CD29、CD90表达阳性.大鼠脑缺血后,无论静脉还是局部移植,rMSCs在脑内均能较长时间存活,移植细胞与宿主有很好组织相容性.静脉移植的细胞集中于脑缺血灶及其周围,缺血灶对侧脑组织移植的细胞较少(P＜0.05);局部移植的细胞随着时间的推移向缺血灶不断迁移,分布在两侧大脑的差别都具有统计学意义(P＜0.05).结论 rMSCs通过静脉及立体定向两条途径进行移植后,能够在宿主缺血的脑中存活,向损伤部位迁移.rMSCs的这种迁移现象很可能与缺血灶的细胞信号改变有关,在临床上具有很大的潜在价值.