烟草烟雾刺激通过骨桥蛋白对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响

摘要

目的 探讨烟草烟雾提取物(cigraette smoke extract,CSE)对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell, VSMC)增殖的影响及骨桥蛋白(osteopontin,Opn)在其中的作用.方法 体外培养VSMC,用不同浓度CSE刺激,并且设置对照组,采用MTT法检测CSE对大鼠VSMC增殖活性的影响,用免疫细胞化学检测CSE作用后VSMC中骨桥蛋白和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达.结果 ①MTT结果 示2.5%、5%CSE 组吸光度(A值)增高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).10%、20%CSE 组A值与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05).对照组VSMC中有少量Opn和PCNA蛋白表达.2.5%CSE组Opn和PCNA蛋白表达增加.5%CSE组Opn和PCNA蛋白表达达到高峰,此后逐渐下降.10%、20%CSE组仍高于高于对照组.②Opn抗体可显著抑制5%CSE诱导的MTT A值和Oon、PCNA蛋白表达增加.结论 ①低浓度 CSE(2.5%、5.0%)对大鼠VSMC的增殖逐渐增加,高浓度(10%、20%)时增殖趋势逐渐下降.②CSE可通过增加Opn的表达促进大鼠VSMC的增殖.