As2O3联用华蟾素对K562细胞Bcr-Abl磷酸化的影响

摘要

目的 研究As2O3联用华蟾素对K562细胞Bcr-Abl蛋白酪氨酸磷酸化的影响，探讨其抗白血病的分子机制，为As2O3和华蟾素联合应用治疗CML提供理论依据。方法 采用细胞增殖实验检测细胞生长；采用Annexin-V/PI双染实验、DNA PI染色及DNA电泳等方法测定细胞凋亡；运用Western blot检测K562细胞Bcr-Abl蛋白酪氨酸磷酸化水平。结果 在As2O3和华蟾素作用下K562细胞生长受抑伴随活力下降，1.0μmol/L As2O3、0.125μg/mL华蟾素、0.25μg/mL华蟾素、1.0μmol/L As2O3+0.125μg/mL华蟾素、1.0μmol/L As2O3+0.25μg/mL华蟾素作用K562细胞24h和48h后，增殖抑制率分别为(24±1.3)％、(21±1.5)％、(38±3.1)％、(57±2.7)％、(66±3.3)％及(49±2.9)％、(48±2.7)％、(61±2.1)％、(77±3.8)％、(82±4.2)％，细胞凋亡率分别为(4.8±0.5)％、(5.6±0.7)％、(9.8±0.6)％、(11.9±1.2)％和(15.2±1.5)％及(11.0±0.9)％、(12.9±1.1)％、(18.4±1.5)％、(21.0±2.0)％、(28.0±1.9)％，凋亡细胞百分率呈时间剂量依赖关系；DNA电泳出现“梯”状条带；Bcr-Abl蛋白酪氨酸磷酸化水平出现时间剂量依赖性下调。结论 As2O3和华蟾素能诱导K562细胞凋亡和抑制其增殖，两药联用具有协同作用，机制与下调K562细胞Bcr-Abl蛋白酪氨酸磷酸化有关。