miR-195调控人乳腺癌细胞MCF-7增殖与凋亡的作用及机制研究

摘要

目的研究miR-195调控人乳腺癌细胞MCF-7(MCF-7)增殖与凋亡作用及机制。方法体外培养正常乳腺上皮细胞MCF-10A(MCF-10A)和MCF-7,qRT-PCR检测miR-195表达,蛋白质免疫印迹(WB)检测蛋白磷酸酶1D(PPM1D)蛋白表达。MCF-7瞬时转染,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法、DNA断裂原位末端标记法观察miR-195对MCF-7增殖和凋亡的影响。双荧光素酶报告基因验证miR-195与PPM1D靶向的关系。结果MCF-7组miR-195表达低于MCF-10A组,PPM1D蛋白表达高于MCF-10A组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-195 mimics组细胞活力低于MCF-7组,miR-195 inhabitor组细胞活力高于MCF-7组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。miR-195 mimics组细胞凋亡率高于MCF-7组,差异有高度统计学意义(P<0.01);miR-195 inhabitor组细胞凋亡率低于MCF-7组,差异有高度统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因结果显示,含有PPM1D基因片段miR-195 mimics组荧光素酶活性低于MCF-7组,差异有高度统计学意义(P<0.01);含有突变PPM1D基因片段miR-195 mimics组与MCF-7两组荧光素酶活性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-195可能通过靶向PPM1D调控乳腺癌细胞增殖与凋亡。