骨髓间充质干细胞来源细胞外基质/胶原蛋白支架促进成纤维细胞运动和迁入

摘要

目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞来源细胞外基质增强成纤维细胞运动和迁入胶原蛋白支架的功能。方法采用细胞裂解和DNA酶解的方法制备出骨髓间充质干细胞来源细胞外基质,通过酶解获得骨髓间充质干细胞来源细胞外基质溶液。将I型胶原蛋白的醋酸溶液和骨髓间充质干细胞来源细胞外基质溶液机械混匀、冻干、饱和戊二醛蒸汽交联后,得到骨髓间充质干细胞来源细胞外基质/胶原蛋白支架,同时,制备纯胶原蛋白支架。扫描电镜观察支架微观结构,检测支架的傅里叶变换红外吸收光谱。将支架埋植于小鼠皮下5 d、10 d后,观察内源细胞迁入支架情况,通过Transwell实验和划痕愈合实验测试支架对人真皮成纤维细胞的运动和迁移的影响。结果骨髓间充质干细胞来源细胞外基质/胶原蛋白支架为连通多孔支架,除含有蛋白质的主要成分外,还含有糖胺聚糖等物质。苏木精-伊红染色显示,相比纯胶原蛋白支架,骨髓间充质干细胞来源细胞外基质/胶原蛋白支架显著促进内源细胞迁入支架内部。ER-TR7免疫染色显示,迁入支架的细胞为成纤维细胞。与纯胶原蛋白支架相比,在骨髓间充质干细胞来源细胞外基质/胶原蛋白支架作用下,穿过Transwell嵌套膜的细胞数均显著增多,划痕伤口愈合率均显著提高。结论通过引入骨髓间充质干细胞来源细胞外基质使胶原蛋白支架具有诱导组织修复细胞运动和迁入支架的活性,是一种潜在的促软组织原位修复新材料。