液相色谱技术在饲料中抗菌肽分离纯化和含量测定的应用研究

摘要

文章旨在分析纯化饲料添加剂中的抗菌肽,为抗菌肽的含量测定及样品检测提供了参考依据.本研究采用过滤膜超滤浓缩,采用固相萃取柱进行洗脱和分离,用过滤膜进行过滤,用高效液相色谱仪进行分离纯化,优化色谱条件,并对不同类型的饲料中抗菌肽的含量进行测定,流动相为甲醇,实验将流速设置为0.75?mL/min,甲醇的体积比为10％,柱温度为31°C,检测波长为526?nm,进样量为10?ul,而后用高效液相色谱仪测定饲料中抗菌肽含量.结果显示:该方法分离纯化获得的抗菌肽蛋白活性较强.该方法检测饲料中抗菌肽的保留时间为7.25?min,呈现单峰,峰值较好,在误差范围呈现线性关系,方法操作简单、快速、安全环保、灵敏度高,应用范围广泛.液体动物饲料添加剂的抗菌肽测定值为2.45?mg/kg,水产动物饲料和家禽饲动物料的抗菌肽测定值分别为3.14?mg/kg和2.56?mg/kg.因此,本实验建立了高效液相测定法有利于饲料中抗菌肽的纯化和饲料中抗菌肽的测定.