底物和酶液稀释对黑曲霉纤维素酶活性测定的影响

摘要

本文采用DNS法测定黑曲霉纤维素酶活性,研究了底物羧甲基纤维素钠(CMC-Na)来源、浓度、纤维素酶浓度和酶液稀释效应对纤维素酶活性测定的影响.结果表明:以Sigma产C5678为底物,纤维素酶活性测定值明显高于上海产的CMC,且C5678浓度≥3%后,其浓度对纤维素酶活性测定值无显著影响;纤维素酶浓度控制在吸光度0.1～0.4,反应进程曲线的线性较好,过高使得曲线下斜;另外,按传统公式计算纤维素酶活性,稀释倍数F越大,酶活性值也越高,使得测定值间缺乏可比性.研究发现将稀释倍数F校正为F0.82后,计算得出的纤维素酶活性值几乎不受稀释倍数影响.