酶法提取海红果总黄酮工艺及海红果黄酮粗提物对HeLa细胞的增殖作用

摘要

研究酶法提取海红果中总黄酮的最佳工艺及海红果黄酮粗提物对人宫颈癌HeLa细胞增殖作用。采用单因素试验考察纤维素酶、果胶酶、复合酶(不同质量比的纤维素酶和果胶酶)及酶解时间、酶解温度、酶解液pH对海红果总黄酮提取率的影响,运用二次通用旋转回归组合设计优化酶法提取海红果总黄酮的最佳提取工艺参数;采用MTT法探讨海红果黄酮粗提物对人宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。结果表明:4个参试因素对海红果中总黄酮提取率影响的大小顺序为:酶的质量浓度>酶解时间>酶解温度>pH。经试验验证,0.25mg/mL的复合酶(质量比为2∶1的纤维素酶和果胶酶)、酶解时间150min、酶解温度50℃、初始酶解液pH 6.0总黄酮提取率最高,达(0.356 3±0.000 6)%(n=5),与理论计算值0.360 0%相对误差仅1.028%,两者有很好的一致性。海红果黄酮粗提物对HeLa细胞的增殖有较强的抑制作用,其对HeLa细胞增殖的半数抑制浓度(IC50)为109.89mg/L。酶法提取海红果中总黄酮的提取率比溶剂浸提法有显著提高;海红果黄酮可以作为一种安全有效的抗肿瘤药物。