ctDNA含量测定的荧光分析新体系研究

摘要

利用荧光光谱法研究了多种不同荧光试剂与ctDNA结合后的光谱特征,实验结果表明,ctDNA能小幅度的增强刚果红的荧光强度,且在十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)表面活性剂存在下体系的荧光强度增强比较大,并在一定范围内荧光增强程度与ctDNA的量呈线性关系,据此,建立了一种测定ctDNA含量的荧光新体系.当反应温度为25℃,反应时间为40min,CR浓度为8.0×10-6 mol·L-1,CTMAB的浓度为3.2×10-5mol·L-1时,ctDNA的浓度在0.005～3.600μg·mL-1范围内,体系的△F与ctDNA的浓度呈良好的线性关系,线性方程为:△F=131.22C+3.8543(C:μg·mL-1),r=0.9988,检测限为0.01μg·mL-1.本方法首次成功地应用于羊驼血液中DNA的测定,回收率为96.25%～102.50%,结果令人满意.