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脂质体介导外源DNA体外转染金黄地鼠卵母细胞的研究

             

摘要

背景与目的 :研究外源DNA在金黄地鼠卵母细胞染色体上的整合率 ,探索卵母细胞作为外源基因载体的可行性。材料与方法 :在体外 ,用脂质体包裹外源NF_Luc质粒 ,将其与金黄地鼠卵母细胞共培养后收获细胞 ,分别用斑点杂交、Southern杂交以及荧光原位杂交分析检测Luc +基因在卵母细胞中的整合。结果 :Southern杂交分析 ,在13个样本DNA中发现9个样本有Luc+基因特异性条带扩增 ;阳性率为69.2 %(48.2 %~94.5 %),荧光原位杂交分析显示 ,在253个转染后卵母细胞中发现 ,2例中期相染色体及3例间期核上有明显的Luc+基因阳性杂交信号。结论 :在国内首次证实金黄地鼠卵母细胞可被脂质体包裹的外源DNA转染 ,即金黄地鼠卵母细胞可以作为外源基因的载体 。

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