DENND2D通过调控PARP1对非小细胞肺癌细胞系H1299中顺铂细胞毒性的影响

摘要

目的:检测肺癌细胞系H1299细胞中DENN/MADD domain containing2D(DENND2D)基因过表达对顺铂细胞毒性的影响,并初步探讨其机制。方法:应用瞬时和稳定转染两种方法使H1299细胞外源过表达DENND2D基因,以空载体组作为对照组,应用CCK-8比色法检测不同浓度顺铂作用下H1299细胞的存活情况,据此计算出IC值。利用Western blot方法检测外源过表达50DENND2D的H1299细胞多聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP1]的表达情况。利用顺铂处理外源过表达DENND2D的H1299细胞,并检测不同处理时间点(0、1、2、4和8h)H1299细胞多聚ADP核糖[poly(ADP-ribose),PAR]的表达情况。结果:顺铂对外源过表达DENND2D基因的H1299细胞毒性明显高于空载体组(IC值降低,P<0.05)。外源过表达DENND2D的50H1299细胞PARP1蛋白和PAR蛋白的表达均比空载体对照组低,且空载体对照组PAR的表达随时间推移呈上升趋势,而外源过表达DENND2D组则呈下降趋势。结论:DENND2D可能通过对PARP1的调控增强了顺铂对肺癌细胞系H1299的细胞毒性。