人乳头瘤病毒16E6蛋白通过内质网应激途径诱导子宫颈癌C33A细胞自噬的研究

摘要

目的研究子宫颈癌C33A细胞中人乳头瘤病毒16 E6（HPV16 E6）蛋白过表达对内质网应激-自噬通路的影响。方法 PCR检测子宫颈癌C33A细胞中HPV的整合情况;构建HPV16 E6的真核表达载体pcDNA3.1--HPV16 E6,转染C33A细胞,即pcDNA3.1--HPVl6 E6组,同时设空载体转染组pcDNA3.1-组和空白对照组（C33A组）,Western blot检测C33A细胞中HPV16 E6蛋白表达的变化及对自噬基因Beclin 1、LC3Ⅱ、内质网应激相关基因IREl、PERK和ATF6蛋白表达的影响。结果 C33A细胞中无HPV整合,选为干预细胞株;成功构建了HPV16 E6的真核表达载体pcDNA3.1--HPVl6 E6,其可以使C33A细胞中HPV16 E6蛋白表达增强,HPV16 E6过表达可使Beclin 1、LC3Ⅱ和IREl、PERK、ATF6蛋白表达增加,与pcDNA3.1-组和C33A组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）。阻断内质网应激通路后,LC3Ⅱ蛋白表达降低。结论 HPV16E6蛋白能促使子宫颈癌C33A细胞自噬增强,该过程是通过内质网应激途径实现的,这一反应可能参与HPV16致子宫颈癌的过程,为子宫颈癌的防治提供了新思路。