溶藻弧菌去乙酰化酶基因cobB克隆及其功能验证

摘要

旨在研究溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)去乙酰化酶cobB基因的功能.进行了cobB基因的克隆,生物信息学分析,CobB蛋白质诱导表达、纯化及功能研究.CobB蛋白质的相对分子质量为27.09750 kD,理论等电点为5.15,化学式为C1186H1865N339O369S10,亲水性平均系数(GRAVY):-0.409,为亲水蛋白.CobB与同弧菌属的魔鬼弧菌(Vibrio diabolicus),哈维弧菌(Vibrio harveyi),霍乱弧菌(Vibrio cholerae)和副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)具有高度同源性,在革兰氏阴性菌中相对保守;融合蛋白大小约为53 kD,去除标签后CobB蛋白分子量约为27 kD;CobB蛋白最适表达条件为37°C,0.4 mmol/L IPTG下诱导4 h.功能分析表明,CobB对乙酰化蛋白具有去乙酰化作用.