甘蓝型油菜TT1基因反义植物表达载体的构建

摘要

拟南芥TT1（transparent testal）基因编码一个WIP类型锌指蛋白转录因子，调控内种皮发育和原花青素在内种皮的积累。本研究通过PCR扩增了甘蓝型油菜（Brassica napus）TT1基因家族（BnTT1）的一段特异保守片段TT1A，并将其亚克隆到中间载体pCambia2301G中，构建了TT1反义植物表达载体pCambia2301G—TT1A，通过PCR鉴定、酶切鉴定和DNA测序证实载体构建成功，并转化到根癌农杆菌LBA4404菌株中形成工程菌株。此表达载体的构建为进一步研究TT1基因在甘蓝型油菜种皮色素合成途径中的分子生物学机理和利用反义TT1基因遗传转化获得转基因新型黄籽油菜奠定了基础。