短蛸AFLP分子标记分析体系的优化与建立

摘要

本研究构建了短蛸扩增片段长度多态性(AFLP)分析体系,对DNA提取、双酶切反应、连接反应、预扩增反应、选择性扩增反应和银染等步骤进行了分析.得到了一种适于短蛸AFLP技术分析的优化体系,该体系中各优化因素为:模板DNA浓度为200 ng/μL;酶切体系中,Mse I和EcoR I各加入5 units,缓冲液使用Mse I buffer Tango,反应时间为3-4 h;连接最适反应时间为12 h;预扩增产物最适稀释倍数为20倍.该体系的构建为AFLP技术在短蛸分子遗传多样性研究中的应用奠定了基础.