辣椒幼苗灌根接种疫霉菌侵染后叶片基因差异表达谱分析

摘要

辣椒在我国是一种重要的蔬菜和加工原料,但在栽培中易受疫霉菌的危害导致严重减产乃至植株毁灭绝收。本文主要采用c DNA-AFLP和Real-time PCR技术,以高抗疫病辣椒品种灌根接种疫霉菌前后不同时间点幼叶为材料,对差异基因及表达谱进行了分析。利用c DNA-AFLP技术共筛选出363条有差异表达的c DNA片段,其中测序了100个差异表达显著的片段,得到73个有效序列。经过Blastx比对和功能分析,有45个基因与已报道功能基因有较高同源性,功能涉及到防御反应、信号转导、碳水化合物和蛋白质代谢等过程,有16个是未知功能的同源性序列,有12个无匹配序列的新基因。从c DNA-AFLP文库中克隆了2个关键防御基因硫堇蛋白TDF8和抗菌蛋白TDF13 c DNA全长,并利用Real-time PCR技术分析了基因表达谱,结果表明硫堇蛋白在疫菌浸染诱导后6h~18h基因表达量明显上调,抗菌蛋白的表达量几乎处于下调状态。本研究可以为辣椒抗疫病分子育种提供宝贵的基因资源和理论基础。