H2O2对新生大鼠心室肌细胞HCN通道电流的影响及其机制

摘要

目的 明确过氧化氢(H2O2)对新生大鼠心肌细胞超极化激活环核苷酸门控离子通道(HCN)电流的影响及其机制.方法 用胶原蛋白酶技术分离新生SD大鼠心室肌获得单一的心室肌细胞,用全细胞膜片钳技术记录HCN通道电流(If);提取心肌细胞膜蛋白,用Western blot检测HCN蛋白的表达.结果 1)将心室肌细胞暴露于H2O2(100 μmol/L) 20 min后,If显著增大(P ＜0.05);2)H2O2增大If电流可被酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein或PP2显著抑制;增大的通道酪氨酸磷酸化水平随之减小(P＜0.05);3)用硫氧还原蛋白受体阻断剂显著抑制H2O2增大的If(P＜0.05);4)非特异性蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)抑制剂可显著增大If(P ＜0.05).结论 H2O2增大If,是通过ROS依赖性的酪氨酸蛋白激酶及其相关的硫氧还原蛋白系统,调控HCN通道的活性和表达.