分泌IL-21的白血病细胞系的建立及其抑瘤作用

摘要

目的 建立及鉴定稳定表达白介素21的4种白血病细胞系,并初步分析其刺激活化的淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤功能.方法 构建携带白介素21和红色荧光蛋白基因的质粒,包装慢病毒,感染4种白血病细胞系,连续传代后,通过荧光显微镜、流式细胞仪和ELISA法鉴定建立的4种细胞系.以稳定分泌IL-21白血病细胞为抗原刺激外周血单个核细胞增殖,细胞分析计数仪检测增殖倍数,流式细胞仪分析淋巴细胞的表型,细胞计数试剂盒(CCK8)检测增殖后的淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤作用.结果 建立稳定表达IL-21的4种细胞系:K562-IL-21、THP-1-IL-21 、jurkat E6-1-IL-21和RPMI8226-IL-21.3份人PBMC在4种分泌IL-21的白血病细胞的作用下都有增殖,增殖倍数在1.147±0.057 ～2.725±0.345倍之间.不同数量的IL-21分泌白血病细胞都可激活淋巴细胞增殖,增殖的倍数在1.127 ±0.152～2.213±0.200之间.增殖后CD3+T淋巴细胞和CD56+ NK细胞的比例降低(P＜0.05),CD19+B淋巴细胞比例增加(P＜0.05);由分泌IL-21白血病细胞激活后的淋巴细胞对母系白血病细胞的杀伤作用明显高于对照组.由分泌IL-21白血病细胞激活后的淋巴细胞对母系白血病细胞和其他7种肿瘤细胞均有杀伤作用,杀伤率在(28.68±9.31)％～(78.45±0.61)％之间.结论 4种分泌IL-21的白血病细胞可刺激PBMC增殖并激活其对肿瘤细胞的杀伤作用.