双酚A对斑马鱼精巢性激素生成酶基因表达的影响

摘要

为了解环境雌激素对鱼类精巢发育的影响,将成年雄性斑马鱼(Danio rerio)暴露于不同浓度双酚A(0、500、1 000、2 000、4 000μg·L-1)下21 d,并在此基础上,进一步研究了暴露在相同浓度(BPA2 000 μg· L-1)不同暴露时间下各基因表达的动力学模式.用荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测试验鱼精巢性激素合成相关细胞色素P450酶类基因(CYP17、CYP11B和CYP19A)以及雌、雄激素受体和促卵泡激素受体(ERα、ERβ、AR和FSHR)基因的表达,用常规组织学方法研究试验鱼精巢结构的变化.结果表明,BPA促进了精巢内源雌激素合成相关酶类基因CYP19A和雌激素受体ERα mRNA、ERβ mRNA的表达,且BPA浓度为2 000 μg· L-1时3者的表达量显著上调,同时随着暴露时间的延长,具有明显的时间累积效应.1000μg·L-1BPA可导致斑马鱼精巢CYP17 mRNA的表达量显著下调,BPA2 000 μg·L-1暴露12 d引起了CY,11B mRNA表达下调,而随着暴露时间的延长有所回升,但它对精巢AR mRNA的表达却无明显影响.同时,BPA 500 μg·L-1引起了FSHR基因的显著上调,在时间动态学上,呈上升趋势.在组织学上,2000 μ,g·L-1BPA引起斑马鱼精巢生精小管内精子浓缩严重,精原细胞(Sg)和精母细胞(PS和SS)数目都有所减少,BPA 4 000 μg·L-1组斑马鱼精巢退化.因此,BPA可诱导精巢内源雌激素合成和雌激素受体的表达,提高雌激素效应,通过抑制CYP17基因的表达,一定程度上抑制雄激素的合成,从而引起斑马鱼精巢组织的破坏.同时,据实验数据推测,雄激素的下调可能启动了下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴的负反馈调节机制,而此作用机制还有待进一步研究.