钝缀锦蛤TXNDC5基因克隆及溶藻弧菌胁迫下表达规律研究

摘要

为探究钝缀锦蛤(Tapes dorsatus) TXNDC5基因特征,本实验采用梯度PCR技术扩增获得TdTXNDC5基因的开放阅读框序列,其长度为1236 bp,可编码411个氨基酸残基。预测得知,钝缀锦蛤TXNDC5蛋白等电点为5.05,理论分子量为46.40 kD,分子中具有3个典型的PDI结构域,N末端具有1段长度为20 aa的信号肽。同源性分析结果显示,钝缀锦蛤TXNDC5蛋白与其它3种海水贝类的同源性为37.9%~70.8%,表明TXNDC5蛋白在不同种类的海水贝类物种中具有一定的保守性。基于TXNDC5蛋白的氨基酸序列构建系统发育树,结果显示钝缀锦蛤仅与硬壳蛤聚为一支。实时荧光定量PCR结果显示,TdTXNDC5基因在钝缀锦蛤的8种组织中均有表达,鳃的表达量最高,外套膜次之。溶藻弧菌胁迫下,TdTXNDC5基因在钝缀锦蛤鳃和内脏团组织中的表达量均在第3 h时达到峰值,外套膜在第6 h达到峰值。上述结果表明,TdTXNDC5基因可能参与了钝缀锦蛤应对细菌感染的过程,在钝缀锦蛤先天免疫防御中具有重要作用。