单细胞凝胶电泳检测蜜蜂冷冻卵(早龄胚胎)的DNA损伤研究

摘要

对蜜蜂早龄胚胎(受精卵)冻融后的DNA质量进行必要的活体筛查与损伤检测,有利于避免将潜在性遗传损害带给后代。本文应用胎盘蓝活体染色实验和单细胞凝胶电泳技术,对4℃下、-20℃下以及-196℃下保存一定时间后依然为活的蜜蜂受精卵进行核DNA损伤的比较性检测研究。将解冻后再次经过胎盘蓝染色技术确认的活的受精卵,放入33℃恒温培养箱内进行孵化观察实验。结果显示:在某一温度下冷冻保存过的卵,核DNA电泳图谱主要呈现出下列四种形式之一或之二:(1)完整的圆形,(2)有略微弥散的边缘,(3)有中等程度的彗星尾巴,(4)有较长的拖尾;由-196℃下复苏解冻的卵可以孵化,但幼虫体表疑似有发育缺陷。结果表明生物染色剂负染可以作为判断卵冻存后活度的一个在细胞学上的技术指标,而单细胞凝胶电泳图谱则可以作为评判卵冻存后质量的一个在DNA水平上的技术指标。