长链非编码RNA LINC00346调控微小RNA-138-5p对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响

摘要

目的研究长链非编码RNA(lncRNA)LINC00346影响宫颈癌细胞增殖和凋亡的分子机制。方法选取2018年1—12月于南阳市中心医院手术治疗的28例宫颈癌病人的宫颈癌组织(实验组)及癌旁正常组织(对照组)为研究对象。根据细胞转染情况分为si-NC组、si-LINC00346组、miR-NC组、miR-138-5p组、si-LINC00346+anti-miR-NC及si-LINC00346+anti-miR-138-5p组;利用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测宫颈癌组织和宫颈癌海拉细胞中LINC00346和微小RNA(miR)-138-5p的表达水平,蛋白质印迹法检测海拉细胞中周期素依赖激酶抑制剂p21(P21)和胱天蛋白酶-3(caspase-3)的蛋白含量,MTT法和流式细胞术测定细胞存活率和凋亡率,双荧光素酶报告系统验证LINC00346和miR-138-5p的靶向关系。结果与正常癌旁组织相比,宫颈癌组织中LINC00346含量显著升高[(2.51±0.08)比(0.99±0.05)](P<0.001);转染si-LINC00346(LINC00346干扰物)后,与si-NC(阴性对照组)相比,si-LINC00346组宫颈癌海拉细胞中的LINC00346含量显著下降[(0.33±0.03)比(1.00±0.05)],P21和caspase-3蛋白含量升高[(0.63±0.04)比(0.22±0.02);(0.79±0.05)比(0.30±0.03)],海拉细胞存活率降低[(52.84±4.39)比(100.00±6.13)],凋亡率升高[(23.39±1.64)比(8.19±1.00)],均差异有统计学意义(P<0.001),敲除LINC00346可降低细胞存活率,提高细胞凋亡率及P21和caspase-3蛋白含量;转染野生型WT-LINC00346的海拉细胞,与miR-NC对照组相比,miR-138-5p组野生型WT-LINC00346的萤火虫荧光素酶相对活性显著下降[(0.24±0.03)比(0.97±0.05)]。敲除LINC00346可显著上调miR-138-5p含量[(2.43±0.07)比(1.01±0.05)](P<0.001)。结论LINC00346通过靶向miR-138-5p调控宫颈癌海拉细胞增殖和凋亡。